精曲小管为蟠曲的细长管道结构,近似圆柱体。通过管腔的切面(或者说轮廓),大体上不是圆形就是椭圆形。圆形轮廓的直径,或者椭圆形轮廓的短径,就是切面处圆柱体形小管的直径。因此,精曲小管的平均直径可如下估计:从每个睾丸随机切取若干张切片,从每张切片随机抽取若干测试视野。在每个测试视野上叠加一个长方形测试框,抽选那些在测试框“内”的有明显管腔的圆形或椭圆形精曲小管轮廓,然后测量这些轮廓的短径——两条与轮廓边界线相切的平行线之间的最短距离(图58一1)。
所谓在测试框“内”,指的是:①完全在测试框内的轮廓,以及②那些只与测试框的右边或/和上边相交叉,而不与测试框的左边、下边、左边向上的延伸线或右边向下的延伸线有任何交叉的轮廓。将从每个睾丸测得的所有精曲小管直径平均,即得精曲小管平均直径的估计。精曲小管直径的变异较小(见下),从每个器官随机测五十来个轮廓可能就够了。 将测试框叠加于组织图像上的实现方式有以下几种情况。
(1)如果是在工作台(桌)上或墙壁上观察显微投影图像,事先在白纸上画好测试框,并将之平整固定于工作台或墙壁上,然后将组织图像垂直投影到测试框上。
(2)如果观察的是显微照片图像,则事先将测试框画、打印或复印于透明胶片上,用时将之叠加于照片上。
(3)如果是在显微镜内直接观察图像,则事先将测试框图案摄制或刻印于适当大小的胶片或玻璃片上,然后将之置于目镜光阑处,观察切片图像时,光阑处的测试框图像就会正好聚焦于图像上。
(4)如果是在显示器上观察图像,制作一个能生成测试框的软件,使测试框图案正好叠映于图像上。这是最理想的办法。
对于投影图像或照片图像,可用普通三角尺测量直径。直接在显微镜内的测量较困难,先选择好待测轮廓后,用目镜测微尺测。最快最好的是在电脑显示器上观察并测量(利用相关软件),例如:先用鼠标点击一点,再点击另一点,然后电脑就显示出这两点之间的距离 用于抽选轮廓的测试框应足够的小,或 者说测试 使能完全看到与测试框相交叉的轮廓的全 貌,或能准确判断与测试框相交叉的轮廓的 走向。
利用无明显组织皱缩或变形的甲基丙烯 酸树脂包埋切片,如上测量的正常成年人(白种人,以下同)、猴Macaca fascicularis猕猴.以下同)和大鼠(SD,以下同)精曲小管的平均直径分别为(205±3)um、(210±7)“m和(299±8)um(均值±标准误,n=5~6)。精曲小管直径的个体差异较小,较能敏感地反映精子发生(管壁内生精细胞数量)的变化情况。例如,利用促性腺激素释放激素拮抗剂致成年猴促性腺激素撤退仅16天后,B型精原细胞和早期初级精母细胞急剧减少,睾丸内生精细胞总数虽平均减少约20%但与对照组相比无显著性差异(P=0.37),睾丸体积也平均减少约20%但也无显著性差异(P=0.34),而此时精曲小管的平均直径显著减少20%(P=0.01)。
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